一、什么是倒置生物显微镜？
 

　　??倒置生物显微镜（Inverted Biological Microscope）?? 是一种将 ??物镜位于载物台下方、光源和聚光镜位于载物台上方?? 的特殊生物显微镜，与常见的正置生物显微镜(物镜在载物台上方)结构相反。
 

　　这种设计使得样品可以从 ??下方放置并观察??，特别适用于 ??培养皿、培养瓶等容器中的活细胞或组织的观察??，无需将样品制作成玻片，也无需频繁移动或翻转样品，非常适合 ??长时间细胞培养观察、活细胞成像、细胞生物学研究、药物筛选、组织工程?? 等领域。
 

　　二、倒置生物显微镜的基本结构组成
 

　　??倒置式光学系统??：物镜在载物台下方，光源和聚光系统在上方。
 

　　??机械载物台??：通常为固定式或有限移动式，用于放置培养皿、培养瓶等。
 

　　??聚光镜与透射光源??：位于样品上方，光线从上往下穿透样品。
 

　　??物镜??：一般为长工作距离物镜，以便在不接触样品容器底部的情况下成像。
 

　　??相机接口 / 成像系统??：支持连接CCD/CMOS摄像头，用于数字成像与记录。
 

　　??荧光?？椋裳。??：用于荧光观察，如细胞标记、蛋白定位等。
 

　　??相差、DIC等附件（可?。??：增强观察对比度，用于无染色样品观察。
 

　　三、倒置生物显微镜的主要用途
 

　　??活细胞观察??：直接观察培养中的活细胞，无需染色或制片。
 

　　??细胞培养监控??：长时间观察细胞分裂、迁移、凋亡等动态过程。
 

　　??组织工程 & 干细胞研究??：观察三维细胞培养、类器官等。
 

　　??药物筛选与毒性测试??：高通量观察细胞对药物的反应。
 

　　??微生物观察??：如细菌、酵母在液体培养基中的生长状态。
 

　　??荧光成像??：观察荧光标记的细胞结构或蛋白表达(需配荧光?？?。
 

　　??相差与DIC观察??：提高透明样品的对比度，无需染色。
  

　　四、倒置生物显微镜的选型指南
 

　　选择合适的倒置生物显微镜，需要根据您的 ??观察需求、样品类型、预算、是否需要成像或荧光功能?? 等因素综合考虑。以下是关键选型要素：
 

　　1. ??观察方式?

 

　　??选型建议??：
 

　　如果只做普通细胞观察 → 明场足够；
 

　　如果观察活细胞且无染色 → 建议配 ??相差??；
 

　　如果有荧光标记实验 → 必须选 ??荧光版本??；
 

　　如需立体结构观察 → 可加 ??DIC??；
 

　　2. ??物镜类型与放大倍数??
 

　　常见物镜放大倍数：??4X、10X、20X、40X、60X、100X??
 

　　??长工作距离物镜（LWD, Long Working Distance）??：是倒置显微镜的关键，因为要透过培养皿底部观察，避免物镜接触样品。
 

　　物镜数值孔径(NA)影响分辨率与对比度，NA越大，成像越清晰。
 

　　??常用配置??：10X、20X、40X 长工作距离相差物镜，根据需求可扩展至60X或100X油镜。
 

　　3. ??光源系统??
 

　　??透射光源（卤素灯 / LED）??：为明场、相差、DIC提供照明。
 

　　??荧光光源（汞灯 / 金属卤素灯 / LED荧光光源）??：用于激发荧光染料，需稳定且光谱匹配。
 

　　??LED光源优势??：寿命长、发热低、即开即用，逐渐成为主流。
 

　　??选型建议??：
 

　　普通观察 → 卤素灯或入门级LED；
 

　　荧光观察 → 高稳定度、多波段LED或汞灯光源，搭配对应滤光块；
 

　　4. ??载物台与样品适配性??
 

　　??固定式载物台??：适合放置标准培养皿(如35mm、60mm)、培养瓶、多孔板等。
 

　　??移动载物台（XY方向微调）??：适合精确定位观察不同区域，但大多数倒置镜为简化设计，载物台固定或微动。
 

　　??适配样品??：培养皿(35/60/100mm)、多孔板(6/12/24/96孔)、培养瓶、载玻片等。
 

　　5. ??成像与数字化??
 

　　??目镜观察??：基础人眼观察。
 

　　??摄像头接口（C-mount）??：连接数码相机或显微摄像头，实现图像采集与分析。
 

　　??软件功能??：图像拍摄、视频录制、细胞计数、融合度分析等。
 

　　??选型建议??：
 

　　如果仅用于人工观察 → 可不配相机；
 

　　如果要做图像记录、数据分析、发表文章 → 建议配 ??高分辨率科研级相机 + 成像软件??；
 

　　6. ??荧光配置（如需）??
 

　　如果涉及荧光观察，需确认以下配置：
 

　　??荧光光源??：单色或白光LED，多波段可选；
 

　　??激发块（Filter Cube）??：针对不同荧光染料(如DAPI、FITC、TRITC、Cy5等)；
 

　　??荧光通道数量??：常见为单通道、双通道、四通道甚至更多；
 

　　??物镜兼容性??：高倍荧光观察可能需要油镜或高NA物镜。
 

　　??常见荧光应用??：细胞周期分析、蛋白定位、转基因表达(如GFP细胞)、钙离子成像等。
 

　　四、倒置生物显微镜典型配置举例

应用场景	推荐配置
??基础细胞观察（教学/工厂）??	明场、10X/20X物镜、卤素或LED光源、固定载物台
??活细胞培养观察（实验室）??	明场 + 相差、20X/40X长工作距离物镜、LED光源
??荧光细胞观察（科研）??	明场 + 荧光（蓝/绿/红激发）、40X/60X物镜、多波段荧光光源、滤光块
??高内涵成像/药物筛选??	高分辨率摄像头、多通道荧光、自动载物台（可?。?、图像分析软件

 

　　五、总结：倒置生物显微镜选型要点

选型因素	关键点
??观察类型??	明场、相差（推荐）、荧光（按需）
??物镜??	长工作距离、高NA、多种放大倍数
??光源??	LED（推荐）、透射+荧光（如有需要）
??样品类型??	培养皿、多孔板、培养瓶等
??成像需求??	是否需要连接相机、软件分析
??预算??	决定品牌与功能配置丰富程度
??使用场景??	教学、科研、工业、药物开发等